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中海油能源發(fā)展股份有限公司海管致腐微生物分析技術(shù)服務(wù)采購技術(shù)要求書引用技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：CGBZ127-2021編制人：作業(yè)部經(jīng)理：技術(shù)中心經(jīng)理：總工/技術(shù)主管領(lǐng)導(dǎo)：（協(xié)議/預(yù)算100萬元以上單項(xiàng)次）一、需求概況中海油（天津）管道工程技術(shù)有限公司（以下簡稱“甲方”）承接了中海油油氣田腐蝕防護(hù)中心“致腐微生理學(xué)特性測(cè)試技術(shù)服務(wù)”項(xiàng)目，項(xiàng)目周期為2024年12月至2025年12月，項(xiàng)目主要工作是對(duì)海管致腐微生物能力分析和種群基因鑒定。因項(xiàng)目需要對(duì)海管致腐微生物進(jìn)行分析，因此，甲方亟需尋求在海管致腐微生物分析技術(shù)方面經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)力量雄厚的第三方單位（以下簡稱“乙方”）提供水樣生物膜形成能力測(cè)試和水樣微生物種群測(cè)試服務(wù)等。二、服務(wù)內(nèi)容和范圍1、服務(wù)內(nèi)容提供海管致腐微生物分析技術(shù)服務(wù)，保質(zhì)保量的完成服務(wù)要求。具體服務(wù)內(nèi)容包括但不限于：菌液濃度測(cè)試、微生物生成硫化氫濃度測(cè)試、在厭氧條件下制備固體及液體培養(yǎng)基、觀測(cè)細(xì)菌附著狀況、硫化氫能力的微生物純菌株分離、微生物測(cè)序等服務(wù)。2、工作量清單序列項(xiàng)目工作內(nèi)容描述單位數(shù)量1水樣生物膜形成能力測(cè)試測(cè)試樣品中生物膜形成能力與生物膜生長動(dòng)態(tài)及形貌特征。項(xiàng)202水樣微生物種群測(cè)試測(cè)試水樣中微生物群落及硫化氫濃度測(cè)試。項(xiàng)1303、服務(wù)地點(diǎn)天津塘沽陸地4、服務(wù)期限合同簽訂期至2025年10月31日，根據(jù)甲方工作量及進(jìn)度要求確定。三、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)/規(guī)范乙方在研究服務(wù)過程中遵從如下標(biāo)準(zhǔn)，各標(biāo)準(zhǔn)均按照最新版本執(zhí)行：GB/T40974核酸樣本質(zhì)量評(píng)價(jià)方法GB/T40171磁珠法DNA提取純化試劑盒檢測(cè)通則GB/T30989高通量基因測(cè)序技術(shù)規(guī)程GB/T35537高通量基因測(cè)序結(jié)果評(píng)價(jià)要求GB/T40226環(huán)境微生物宏基因組檢測(cè)高通量測(cè)序法T/CSTM000467低合金結(jié)構(gòu)鋼腐蝕試驗(yàn)第7部分：模擬微生物腐蝕試驗(yàn)四、服務(wù)要求1、設(shè)計(jì)/施工方案要求：乙方應(yīng)按照甲方提供海管致腐微生物相關(guān)信息，編制并提報(bào)符合要求的施工方案。2、服務(wù)具體要求：21人員要求乙方提供的服務(wù)人員需具有相應(yīng)的技術(shù)能力、資質(zhì)證書、相關(guān)經(jīng)驗(yàn)、學(xué)歷及社會(huì)保險(xiǎn)。具體要求如下：1）項(xiàng)目負(fù)責(zé)人需要有高級(jí)職稱并有以負(fù)責(zé)人身份承擔(dān)國家級(jí)科研課題的經(jīng)歷；2）項(xiàng)目成員具有微生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的碩士研究生及以上學(xué)歷的人數(shù)不少于3人；3）能獨(dú)立按照國家或行業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、施工方案完成項(xiàng)目實(shí)施方案的編寫與審核；4）具備良好的協(xié)調(diào)處理質(zhì)量、進(jìn)度問題的能力，能對(duì)復(fù)雜、疑難的質(zhì)量、進(jìn)度問題提出合理化的處理建議或思路。22技術(shù)參數(shù)及具體要求：水樣生物膜形成能力測(cè)試：采用厭氧微生物技術(shù)活化純菌株，按照1%接種量接種于特定厭氧培養(yǎng)基中，在目標(biāo)實(shí)驗(yàn)條件下培養(yǎng)5-60天，定期取樣觀測(cè)細(xì)菌附著狀況，通過電子顯微鏡熒光顯微鏡觀察生物被膜動(dòng)態(tài)變化情況。水樣微生物種群測(cè)試：使用高質(zhì)量的DNA提取試劑盒從水樣微生物細(xì)胞生物量樣品提取基因組DNA，對(duì)DNA濃度及純度質(zhì)檢后，再使用原核微生物通用引物擴(kuò)增目的基因片段構(gòu)建基因文庫。采用DNA高通量測(cè)序儀對(duì)目的基因進(jìn)行測(cè)序，通過生物信息學(xué)分析明確水樣中微生物種群結(jié)構(gòu)和多樣性特征。DNA保藏溫度-40℃~-85℃；PCR擴(kuò)增無外源DNA等污染。在厭氧條件下制備固體及液體培養(yǎng)基，然后采用滾管法結(jié)合厭氧微生物工作站從水樣中分離具有產(chǎn)硫化氫能力的微生物純菌株。每個(gè)樣品初篩菌株不低于20株。經(jīng)過幾輪次滾管分離直至獲得純菌株。然后通過PCR法擴(kuò)增純菌16SrRNA基因近全長序列，經(jīng)純化后測(cè)序。進(jìn)一步通過序列比對(duì)法結(jié)合純菌生理生化特征及基因組特征對(duì)特定純菌進(jìn)行分類鑒定。23HSE要求231乙方至少應(yīng)提供如下QHSE相關(guān)材料：1）設(shè)置安全生產(chǎn)管理組織機(jī)構(gòu)證明文件；2）全員安全生產(chǎn)責(zé)任制度；3）法人\主要負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的QHSE管理體系制度，第三方體系認(rèn)證證書；4）與投標(biāo)業(yè)務(wù)相匹配的資質(zhì)證書、經(jīng)驗(yàn)和業(yè)績證明材料；5）項(xiàng)目經(jīng)理、領(lǐng)班、安全監(jiān)督等主要管理人員的資格證書、與投標(biāo)業(yè)務(wù)類似行業(yè)工作經(jīng)歷；6）近三年是否涉及QHSE相關(guān)行政處罰/訴訟記錄的證明文件；7）近三年的生產(chǎn)安全事故情況。232勞保用品配備及入場(chǎng)安全培訓(xùn)教育要求：1)涉及專業(yè)分包的承包商單位，配備承包商本單位統(tǒng)一的、符合中國海油作業(yè)場(chǎng)所標(biāo)準(zhǔn)的勞保用品；2)涉及勞務(wù)分包或勞務(wù)服務(wù)的承包商人員，按合同約定由甲方配備滿足海油發(fā)展統(tǒng)一要求的勞保用品；