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云南省農(nóng)業(yè)科學院茶葉研究所采購技術測試和分析服務(第一批)公開招標公告采購需求.docx

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盤龍區(qū) 2025-10-31 22.81KB 業(yè)主:云南省農(nóng)業(yè)科學院茶葉研究所
內(nèi)容簡介

采購需求序號服務名稱規(guī)格數(shù)量單位單價(元)總價(元)技術參數(shù)/質量要求1大環(huán)多肽內(nèi)酰胺化合物合成30mg12管250030000化合物純度95%以上。2藥物靶點分析聯(lián)合轉錄組學+蛋白組+藥物親和標記法+生信數(shù)據(jù)分析2個3000060000采用IlluminaNovaSeq平臺,測序深度≥50Mcleanreads/樣本,參考基因組比對率≥90%;可信蛋白數(shù)量≥6000個,篩選高置信度靶點蛋白。質量要求:設置陽性對照和陰性對照組;蛋白質檢定FDR≤1%;質譜數(shù)據(jù)重復三次技術重復。3基因調(diào)控基因敲除1個2000020000CRISPR/Cas9針對基因的外顯子區(qū)域設計至少3條獨立的gRNA,并預測脫靶效應;WesternBlot驗證敲除效率。質量要求:獲得的單克隆細胞系或個體,其敲除效率需≥80%(蛋白水平)或移碼突變率≥90%(DNA水平)。4分子合作分析分子互作LC-MS分析2個1100022000IP后使用高分辨率LC-MS/MS平臺,使用MaxQuant等軟件進行搜庫,數(shù)據(jù)庫為UniProt。質量要求:設置同型IgG對照,互作蛋白需在至少兩次生物學重復中出現(xiàn),蛋白檢定FDR≤1%。5微生物多樣性分析-真菌土壤或植物樣品50個20010000針對真菌ITS1進行擴增子測序,IlluminaMiSeq-PE250平臺,分析數(shù)據(jù)包括序列質量控制、OTU/ASV聚類、Alpha和Beta多樣性(PCoA,NMDS)分析等。質量要求:DNA樣品質量OD260/280在18-20之間,濃度≥10ng/μL,總量≥1μg,有效數(shù)據(jù)量≥50,000reads/樣本。6微生物多樣性分析-細菌土壤或植物樣品50個20010000針對細菌16SrRNA基因的V3-V4或V4-V5高變區(qū)進行擴增子測序。分析數(shù)據(jù)包括序列質量控制、OTU/ASV聚類、Alpha和Beta多樣性(PCoA,NMDS)分析等。質量要求:DNA樣品質量OD260/280在18-20之間,濃度≥10ng/μL,總量≥1μg,有效數(shù)據(jù)量≥50,000reads/樣本。7分子驗證分子調(diào)控功能回復驗證2個1000020000通過質粒轉染/病毒transduction重新引入目標基因的野生型CDS(或功能突變體),使用qPCR驗證基因表達恢復,WesternBlot驗證蛋白表達恢復。質量要求:目標基因/蛋白的表達水平應恢復至正常對照的70%以上。表型檢測需進行三次獨立的生物學重復,數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學顯著性(p<005)。8微生物群落土壤或植物樣品60個200120001使用IlluminaNovaseq主流高通量測序平臺進行PE250測序;2單樣本測序數(shù)據(jù)量(rawtags)為5萬條,單樣本交付數(shù)據(jù)量不少于承諾數(shù)據(jù)量的100%,要求原始數(shù)據(jù)Q30>85%。3根據(jù)送樣要求,可對樣品進行16SrDNA測序、18SrDNA測序、ITS測序或目標區(qū)域擴增測序等。9茶葉微生物多樣性土壤或植物樣品100個2016201601使用IlluminaNovaseq主流高通量測序平臺進行PE250測序;2單樣本測序數(shù)據(jù)量(rawtags)為5萬條,單樣本交付數(shù)據(jù)量不少于承諾數(shù)據(jù)量的100%,要求原始數(shù)據(jù)Q30>85%。3根據(jù)送樣要求,可對樣品進行16SrDNA測序、18SrDNA測序、ITS測序或目標區(qū)域擴增測序等。10斑馬魚焦慮模型構建及評價斑馬魚焦慮模型構建及評價2000組1122000(一)實驗動物專項要求品種與品系:明確使用野生型AB品系斑馬魚。規(guī)格標準:選取發(fā)育階段一致的斑馬魚,以減少個體發(fā)育差異對實驗數(shù)據(jù)的影響。健康狀態(tài):斑馬魚需無體表損傷、畸形(如脊柱彎曲、鰭條殘缺)、體色異常等情況,活動能力正常(對外界刺激反應靈敏,游動姿態(tài)協(xié)調(diào))。飼養(yǎng)環(huán)境前置要求:實驗機構需提供符合斑馬魚飼養(yǎng)標準的環(huán)境,包括:水溫控制在26±1℃,pH值維持在70-75,溶解氧≥5mg/L,氨氮≤005mg/L;光照周期為14h光照(光照強度300-500lux)、10h黑暗,避免強光直射或光照不穩(wěn)定;飼養(yǎng)用水需經(jīng)曝氣、過濾處理,每日更換1/3水量,確保水質穩(wěn)定。(二)實驗分組細化要求分組原則:采用隨機分層法進行分組,先將符合規(guī)格的斑馬魚按體長、體重進行分層,再隨機抽取個體分配至各實驗組。組別設置與處理細節(jié):正常組:30尾斑馬魚,僅置于正常飼養(yǎng)水環(huán)境中,不進行誘導,也不給予任何藥物或樣品,全程給予等量空白溶劑(如超純水),作為空白對照。模型組:30尾斑馬魚,先置于含PTZ的誘導水環(huán)境中構建焦慮模型,誘導結束后轉移至正常水環(huán)境,不給予陽性藥或樣品,僅給予等量空白溶劑,作為模型對照。陽性組(艾司唑侖組):30尾斑馬魚,經(jīng)PTZ誘導構建焦慮模型后,立即通過水溶方式給予艾司唑侖,給藥體積與模型組、正常組的空白溶劑體積一致。樣品組:30尾斑馬魚,經(jīng)PTZ誘導構建焦慮模型后,通過水溶方式給予待評價樣品,給藥方式、給藥體積與陽性組保持一致,確保實驗條件的平行性。(三)實驗方法①實驗動物:野生型AB品系。①實驗分組:正常組、模型組、陽性組(艾司唑侖)、樣品組,每組30尾。①實驗方法:取斑馬魚于微孔板中,每組30尾。除正常組外,用PTZ誘導斑馬魚焦慮模型。水溶給予陽性藥和樣品,同時設置正常組和模型組。(四)檢測指標斑馬魚焦慮模型的評價需圍繞“模型構建有效性”與“樣品抗焦慮功效”兩大核心目標,從行為學、生理生化、分子水平等多維度設計指標,確保結果的科學性與可靠性。以下是基于標準化實驗流程的關鍵評價指標:1、核心行為學指標(直接反映焦慮狀態(tài))行為學指標是評價斑馬魚焦慮模型最直觀、最常用的維度,通過觀察斑馬魚在特定環(huán)境中的運動模式、空間偏好等,判斷其焦慮程度,同時也是評估樣品緩解功效的核心依據(jù)。11總運動距離(基礎核心指標)檢測意義:焦慮狀態(tài)下的斑馬魚會因應激反應減少活動量,表現(xiàn)為總運動距離顯著降低;若樣品具有抗焦慮功效,可逆轉這一趨勢,使總運動距離回升至接近正常組水平。該指標是此前采購需求中明確的核心檢測項,也是模型有效性的基礎判斷標準。檢測方法:使用AquaScan-2DPro斑馬魚行為分析系統(tǒng),將斑馬魚置于微孔板或行為檢測槽中,記錄特定時間內(nèi)的運動軌跡,系統(tǒng)自動計算總運動距離。判斷標準:模型有效性:與正常組相比,模型組的總運動距離需顯著降低;樣品功效:與模型組相比,樣品組的總運動距離需顯著增加,且高濃度組可能接近陽性組(如艾司唑侖組)水平。12空間偏好指標(反映焦慮相關的避險行為)斑馬魚具有“趨暗避亮”“趨邊避中”的天然習性,焦慮狀態(tài)下會更傾向于躲避開闊、明亮區(qū)域,這類空間偏好變化是焦慮行為