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技術(shù)要求一、疫情監(jiān)測(cè)普查（一）日常監(jiān)測(cè)。主要任務(wù)是及時(shí)發(fā)現(xiàn)、準(zhǔn)確鑒定、及時(shí)報(bào)告疫情。1、監(jiān)測(cè)范圍。未發(fā)生疫情和已實(shí)現(xiàn)無(wú)疫情的松林(小班、散生松林)。重點(diǎn)加強(qiáng)電網(wǎng)和通信線路沿線，通信基站、公路、鐵路、水電等建設(shè)工程施工區(qū)域附近，木材集散地周邊，自然保護(hù)地，以及疫區(qū)毗鄰地區(qū)的日常監(jiān)測(cè)。2、監(jiān)測(cè)時(shí)間。常態(tài)化巡查，一般2個(gè)月至少巡查一遍。重點(diǎn)區(qū)域應(yīng)加大巡查頻次。3、監(jiān)測(cè)內(nèi)容。及時(shí)發(fā)現(xiàn)松樹枯死、松針變色等異常情況。對(duì)出現(xiàn)松針變色等異常情況的松樹取樣鑒定，盡早盡快確認(rèn)是否發(fā)生松材線蟲病，對(duì)確認(rèn)新發(fā)疫情松林小班及周邊地區(qū)進(jìn)行詳查。4、監(jiān)測(cè)方法。（1）地面巡查。統(tǒng)籌生態(tài)護(hù)林員、鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）及林場(chǎng)管護(hù)人員和社會(huì)組織力量，組建監(jiān)測(cè)調(diào)查隊(duì)伍，根據(jù)當(dāng)?shù)厮闪址植继攸c(diǎn)，落實(shí)以小班為單位的網(wǎng)格化巡查路線，采取目測(cè)或者使用望遠(yuǎn)鏡等方法觀察并記錄松樹異常情況。（2）航天航空遙感調(diào)查。有條件的地方可應(yīng)用亞米級(jí)衛(wèi)星遙感影像數(shù)據(jù)或航空遙感監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)分析松樹異常情況。遙感監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)松樹異常后，立即開展地面核實(shí)核查。應(yīng)用“林草生態(tài)網(wǎng)絡(luò)感知系統(tǒng)松材線蟲病疫情防控監(jiān)管平臺(tái)”及其移動(dòng)端監(jiān)測(cè)APP,實(shí)現(xiàn)疫情監(jiān)測(cè)調(diào)查精細(xì)化可視化管理。5、取樣。對(duì)發(fā)現(xiàn)的枯死、瀕死松樹，首先排除其他死亡原因（如人畜破壞、森林火災(zāi)、凍害、水漬及其他病蟲害等），查找是否表現(xiàn)松材線蟲病典型外部癥狀，抽取尚未完全枯死或剛枯死不久的優(yōu)勢(shì)木（針葉呈黃綠或黃褐色，尚未完全枯萎，樹皮尚未脫落，材質(zhì)尚未腐朽）進(jìn)行取樣鑒定，并填寫《松材線蟲病林業(yè)小班調(diào)查抽樣記錄表》。（1）取樣對(duì)象。重點(diǎn)選擇尚未完全枯死或者剛枯死的松樹，避免選擇針葉已全部脫落、材質(zhì)已腐朽的枯死松樹。（2）取樣部位。整株枯死的，在樹干胸高處取樣；對(duì)于僅部分枝條表現(xiàn)癥狀的，在樹干上部和死亡枝條上取樣；春季在蛹室周圍取樣。（3）取樣方法。對(duì)可疑病株剝凈樹皮和去除外圍木質(zhì)部，砍取100-200克木片，或用手搖鉆從木質(zhì)部至髓心鉆取同樣重量的木屑，或者在取樣部位分別截取2-5厘米厚的圓盤。所取樣品應(yīng)當(dāng)及時(shí)貼上標(biāo)簽，標(biāo)明樣品號(hào)、取樣地點(diǎn)(需標(biāo)明地理坐標(biāo))、樹種、樹齡、取樣部位、取樣時(shí)間和取樣人等信息。（4）取樣數(shù)量。對(duì)發(fā)現(xiàn)有異常死亡松樹的小班，死亡松樹數(shù)量小于100株的，先取10株進(jìn)行檢測(cè)，如沒(méi)有檢測(cè)到松材線蟲，應(yīng)當(dāng)繼續(xù)取樣檢測(cè)，直至死亡松樹全部取樣檢測(cè)為止；死亡松樹數(shù)量大于100株的，如取樣100株仍未檢測(cè)到松材線蟲，對(duì)超出部分按5%的比例進(jìn)行抽樣檢測(cè)。如仍未檢測(cè)出松材線蟲，但在日常監(jiān)測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常死亡松樹數(shù)量增加的，應(yīng)繼續(xù)取樣檢測(cè)。重點(diǎn)預(yù)防區(qū)可視情況增加取樣數(shù)量。對(duì)已經(jīng)確認(rèn)疫情的鄉(xiāng)鎮(zhèn)，可根據(jù)實(shí)際工作需要進(jìn)行取樣。（5）樣品的保存與處理。采集的樣品應(yīng)當(dāng)及時(shí)分離鑒定，樣品分離鑒定后須及時(shí)銷毀。樣品若需短期保存，可將樣品裝入塑料袋內(nèi)，扎緊袋口，在袋上扎若干小孔，放入4℃冰箱；木段、圓盤可直接裹上幾層濕紗布后放入4℃冰箱保存。若需較長(zhǎng)時(shí)間保存，要定期在樣品上噴水保濕。6、分離鑒定。（1）分離。采用貝爾曼漏斗法或者淺盤法分離松材線蟲，分離時(shí)間一般需12小時(shí)以上。將分離液體收集到試管或者燒杯中，通過(guò)自然沉淀或者使用離心機(jī)處理后進(jìn)行鑒定。（2）鑒定。①形態(tài)學(xué)鑒定。僅適用于松材線蟲雌雄成蟲，以雌成蟲為主。將制作好的玻片置于顯微鏡下觀察其形態(tài)，判別是否為松材線蟲。若分離的線蟲為幼蟲，需培養(yǎng)至成蟲后進(jìn)行鑒定。②分子檢測(cè)。適用于松材線蟲各蟲態(tài)。松材線蟲分離、培養(yǎng)、檢測(cè)鑒定的具體方法可參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《松材線蟲病檢疫技術(shù)規(guī)程(GB/T23476-2009))進(jìn)行，或按照分子檢測(cè)設(shè)備使用說(shuō)明書操作。（二）專項(xiàng)普查。主要任務(wù)是全面掌握疫情發(fā)生情況和防控成效，為科學(xué)決策和制定下一年度防治方案提供支撐。1、普查組織與責(zé)任?？h級(jí)林業(yè)主管部門負(fù)責(zé)組織普查人員，確定責(zé)任區(qū)，具體實(shí)施調(diào)查，樣本初步鑒定；市級(jí)林業(yè)主管部門負(fù)責(zé)重點(diǎn)區(qū)域核查，復(fù)檢可疑樣本，抽查核實(shí)縣級(jí)普查結(jié)果，并對(duì)可疑新疫點(diǎn)進(jìn)行復(fù)查；省級(jí)林業(yè)主管部門負(fù)責(zé)督察與技術(shù)指導(dǎo)，新疫情發(fā)生區(qū)樣本檢測(cè)、認(rèn)定及疫情上報(bào)。2、普查范圍。所有松樹分布區(qū)。3、普查時(shí)間。每年1次。一般于每年9月-11月進(jìn)行專項(xiàng)普查。4、普查內(nèi)容。結(jié)合日常監(jiān)測(cè)，查清本轄區(qū)死亡(病死、其他原因致死)松樹數(shù)量、發(fā)生分布地點(diǎn)、范圍、樹種、發(fā)生面積。確定疫情分布邊界，繪制疫情分布示意圖、疫情分布詳圖。5、普查方法。同日常監(jiān)測(cè)。其中，對(duì)已確認(rèn)發(fā)生疫情的小班，直接進(jìn)行詳查。6、普查結(jié)果上報(bào)。調(diào)查結(jié)束后，市、縣兩級(jí)林業(yè)主管部門要及時(shí)對(duì)普查資料進(jìn)行匯總，并以正式文件向上級(jí)林業(yè)主管部門和同級(jí)人民政府報(bào)告普查結(jié)果。報(bào)送內(nèi)容包括本轄區(qū)松材線蟲病發(fā)生情況、普查工作開展情況，以及松材線蟲病普查統(tǒng)計(jì)表和松材線蟲病發(fā)生情況匯總統(tǒng)計(jì)表。（三）疫情確認(rèn)、報(bào)告、公布和撤銷。1、疫情確認(rèn)。首次發(fā)現(xiàn)疑似松材線蟲病疫情的縣級(jí)行政區(qū)，按照分級(jí)負(fù)責(zé)原則，先由縣級(jí)林業(yè)主管部門初步鑒定后，報(bào)市級(jí)林業(yè)主管部門復(fù)核，最后由省級(jí)檢測(cè)鑒定機(jī)構(gòu)（江西省林業(yè)有害生物防治檢疫中心）進(jìn)行檢測(cè)鑒定確認(rèn)。送樣時(shí)逐級(jí)填寫《新疫情發(fā)生區(qū)（點(diǎn)）樣品送檢表》。已發(fā)生松材線蟲病疫情的縣級(jí)行政區(qū)，其轄區(qū)內(nèi)新發(fā)鄉(xiāng)鎮(zhèn)級(jí)疫情由縣級(jí)或市級(jí)林業(yè)主管部門進(jìn)行檢測(cè)鑒定確認(rèn)。2、疫情詳查。以小班為單位，詳細(xì)調(diào)查疫情發(fā)生地點(diǎn)、寄主種類、發(fā)生面積(以小班為單位統(tǒng)計(jì)，非林地發(fā)生疫情不統(tǒng)計(jì)發(fā)生面積，只統(tǒng)計(jì)病死松樹數(shù)量)、病死松樹數(shù)量、林分狀況，并對(duì)病死松樹進(jìn)行