第1頁共2頁附件1:采購需求包號(hào)項(xiàng)目名稱采購需求預(yù)算單價(jià)(萬元)1激素性股骨頭壞死疾病中CBL泛素化誘導(dǎo)NRF2下調(diào)導(dǎo)致軟骨細(xì)胞氧化壓力性死亡的分子機(jī)制研究(試劑耗材)試劑耗材明細(xì):序號(hào)產(chǎn)品名規(guī)格單位數(shù)量1山羊抗兔IgGH&L(HRP)500ug支32蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(通用型,50X)2ml支53增強(qiáng)型RIPA裂解液100ml瓶54BCA蛋白濃度測定試劑盒2500次盒55NewFlashProteinAnyKDPAGE快速蛋白凝膠試劑盒1Kit盒46磷酸鹽緩沖液(PBS)500ml/瓶瓶77彩虹180廣譜蛋白Marker(11-180KD)500T袋38超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒(NcmECLUltra)500ml/瓶盒49ChamQUniversalSYBRqPCRMasterMix500rxns袋310HiscriptⅢRTsuperMIXforqPCR(+gDNAwiper)100rxn100rxns(20μl/rxn)袋111總RNA提取試劑盒50次盒51210%彩色凝膠快速試劑盒60-120gels盒5▲驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求:1外觀:試劑耗材的包裝完整,無破損、污染或變形等問題。沒有明顯的異常情況。2標(biāo)簽和標(biāo)識(shí):試劑耗材上的標(biāo)簽和標(biāo)識(shí),包括批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期等信息,確保與購買訂單或產(chǎn)品說明一致。3規(guī)格和數(shù)量:試劑耗材的規(guī)格和數(shù)量,確保與購買訂單或產(chǎn)品說明一致,數(shù)量齊全。4溫度要求:根據(jù)試劑耗材的要求,其在運(yùn)輸過程中需要符合要求的溫度條件。需要確保試劑的完整性和穩(wěn)定性。48第2頁共2頁2激素性股骨頭壞死疾病中CBL泛素化誘導(dǎo)NRF2下調(diào)導(dǎo)致軟骨細(xì)胞氧化壓力性死亡的分子機(jī)制研究內(nèi)容明細(xì):▲1從GEO數(shù)據(jù)庫中獲取股骨頭壞死相關(guān)數(shù)據(jù)集分析尋找對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)。周期:2個(gè)月▲2臨床樣本檢測:激素性股骨頭壞死患者和對(duì)照組關(guān)節(jié)軟骨組織樣品(5Vs5)使用流式細(xì)胞術(shù)檢測ROS技術(shù)要求:需完成10個(gè)樣本(每組5個(gè))的檢測,每個(gè)樣本檢測3次周期:1個(gè)月▲3培養(yǎng)人軟骨細(xì)胞C28/I2細(xì)胞系,使用地塞米松對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理,并完成CBL基因敲降質(zhì)粒構(gòu)建,隨后在細(xì)胞內(nèi)對(duì)CBL基因進(jìn)行敲降處理。對(duì)以上細(xì)胞使用CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞增值能力;使用流式細(xì)胞術(shù)檢測ROS細(xì)胞內(nèi)活性氧含量;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。技術(shù)要求:每個(gè)細(xì)胞完成3個(gè)生物學(xué)重復(fù),3個(gè)技術(shù)重復(fù)的實(shí)驗(yàn)。周期:4個(gè)月▲4構(gòu)建激素性股骨頭壞死動(dòng)物模型:10周齡,雄性C57BL/6小鼠,通過每周1次肌肉注射25mg/kgDEX(地塞米松),在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)(對(duì)照組)注射等量的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)作為對(duì)照。肌肉注射8周后進(jìn)行取材觀察。小鼠處死后取股骨頭組織拍照后進(jìn)行TUNEL染色觀察冠狀面切片組織細(xì)胞死亡,使用流式細(xì)胞術(shù)檢測ROS細(xì)胞內(nèi)活性氧含量;使用甲苯胺藍(lán)染色檢測股骨頭冠狀面切片軟骨組織。技術(shù)要求:每組動(dòng)物完成6個(gè)生物學(xué)重復(fù),每個(gè)檢測完成6個(gè)重復(fù)。周期:4個(gè)月▲驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求:1生物信息學(xué)分析的原始數(shù)據(jù)及圖片2流式細(xì)胞儀檢測等實(shí)驗(yàn)交付原始數(shù)據(jù)、分析結(jié)果及量化圖3所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果需完成分析作圖4病理實(shí)驗(yàn)交付不同拍攝倍數(shù)的原始圖片及量化圖5
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