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第1頁(yè)共5頁(yè)附件1：采購(gòu)需求包號(hào)項(xiàng)目名稱(chēng)采購(gòu)需求預(yù)算單價(jià)（萬(wàn)元）1口腔粘膜及唾液蛋白組+微生物測(cè)序內(nèi)容明細(xì)：完成20例樣本的測(cè)序工作并對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)控/分析；測(cè)序合同承諾測(cè)序數(shù)據(jù)量為平均測(cè)序數(shù)據(jù)量，每個(gè)樣本的測(cè)序數(shù)據(jù)量不少于承諾平均數(shù)據(jù)量的98%（其中，二代擴(kuò)增子單樣本數(shù)據(jù)量不少于承諾數(shù)據(jù)量的100%），總測(cè)序數(shù)據(jù)量達(dá)到1000Grawdata。1樣本檢測(cè)：對(duì)甲方提供的20例核酸/組織樣本進(jìn)行合格性檢測(cè)；2建庫(kù)服務(wù)：完成20例樣本的蛋白組+微生物組建庫(kù)；3庫(kù)檢與上機(jī)：對(duì)建庫(kù)產(chǎn)物進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，合格后完成上機(jī)測(cè)序（總數(shù)據(jù)量1000Grawdata）；4生物信息分析:①對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行去除接頭、污染序列及低質(zhì)量reads的處理；②數(shù)據(jù)產(chǎn)出統(tǒng)計(jì)及測(cè)序數(shù)據(jù)的成分和質(zhì)量評(píng)估。5周期：90個(gè)日歷天。驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求：1測(cè)序數(shù)據(jù)量：每個(gè)樣本測(cè)序數(shù)據(jù)量不少于承諾平均數(shù)據(jù)量的98%（二代擴(kuò)增子單樣本數(shù)據(jù)量不少于承諾數(shù)據(jù)量的100%），總數(shù)據(jù)量達(dá)標(biāo)1000Grawdata；2分析質(zhì)量：完成原始數(shù)據(jù)處理及質(zhì)量評(píng)估，分析流程符合標(biāo)準(zhǔn)；3實(shí)驗(yàn)保障：NGS樣本檢測(cè)合格后實(shí)驗(yàn)意外失敗（建庫(kù)失?。?，免費(fèi)重復(fù)試驗(yàn)至達(dá)標(biāo)（第二次建庫(kù)仍失敗且甲方無(wú)法提供新樣本的除外）。32激素性股骨頭壞死疾病中CBL泛素化誘導(dǎo)NRF2下調(diào)導(dǎo)致軟骨細(xì)胞氧化壓力性死亡的分子機(jī)制研究（試劑耗材）耗材明細(xì)：序號(hào)產(chǎn)品名規(guī)格單位數(shù)量1β-Actin(13E5)RabbitmAb#4970300ul/支支12蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物(通用型,50X)2ml/支支23增強(qiáng)型RIPA裂解液100ml/瓶瓶14BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒2500次/盒盒25NewFlashProteinAnyKDPAGE快速蛋白凝膠試劑盒1Kit/盒盒26磷酸鹽緩沖液(PBS)500ml/瓶瓶17彩虹180廣譜蛋白Marker(11-180KD)500T/袋袋130016第2頁(yè)共5頁(yè)8超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒（NcmECLUltra）500ml/盒盒1910%彩色凝膠快速試劑盒60-120gels/盒盒210通用型抗體稀釋液500ml/瓶瓶311ChamQUniversalSYBRqPCRMasterMix500rxns/袋袋112總RNA提取試劑盒50次/盒盒113山羊抗兔IgGH&L(HRP)500ug/支支2周期：7個(gè)日歷天。驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求：1外觀：試劑耗材的包裝完整，無(wú)破損、污染或變形等問(wèn)題。沒(méi)有明顯異常情況。2標(biāo)簽和標(biāo)識(shí)：試劑耗材上的標(biāo)簽和標(biāo)識(shí)，包括批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期等信息，確保與購(gòu)買(mǎi)訂單或產(chǎn)品說(shuō)明一致。3規(guī)格和數(shù)量：試劑耗材的規(guī)格和數(shù)量，確保與購(gòu)買(mǎi)訂單或產(chǎn)品說(shuō)明一致。數(shù)量齊全。4溫度要求：根據(jù)試劑耗材的要求，其在運(yùn)輸過(guò)程中需要符合要求的溫度條件。需要確保試劑的完整性和穩(wěn)定性。5保質(zhì)期：試劑耗材的保質(zhì)期需要符合要求，確保試劑在保質(zhì)期內(nèi)。6配件和附件：試劑耗材附帶所需的配件和附件，如使用說(shuō)明書(shū)、安全數(shù)據(jù)表、標(biāo)準(zhǔn)曲線等齊全。3焦慮抑郁促進(jìn)BAL/BC小鼠乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究（試劑耗材）耗材明細(xì)：序號(hào)名稱(chēng)規(guī)格單位數(shù)量1TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒50T/盒盒12IL-1β96T/盒盒23TNF-α96T/盒24TGF-β96T/盒盒25IL-1096T/盒盒26特級(jí)胎牛血清500ml/瓶瓶1725cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶20個(gè)/包200個(gè)/箱箱1896孔板1塊/包100塊箱箱196孔板1片/包25塊/箱箱110小鼠乳腺癌細(xì)胞1×10^6Cells/T25/株株245第3頁(yè)共5頁(yè)11TaqProUniversalSYBRqPCRMasterMix500rxns（20μl/rxn）Kit212HiScriptIIIRTSuperMixforqPCR(+gDNAwiper)100rxns（20μl/rxn）Kit213HE染色試劑盒3*500ml/瓶瓶2周期：20個(gè)日歷天。驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求：1外觀：試劑耗材的包裝完整，無(wú)破損、污染或變形等問(wèn)題。沒(méi)有明顯異常情況。2標(biāo)簽和標(biāo)識(shí)：試劑耗材上的標(biāo)簽和標(biāo)識(shí)，包括批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期等信息，確保與購(gòu)買(mǎi)訂單或產(chǎn)品說(shuō)明一致。3規(guī)格和數(shù)量：試劑耗材的規(guī)格和數(shù)量，確保與購(gòu)買(mǎi)訂單或產(chǎn)品說(shuō)明一致。數(shù)量齊全。4RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和qRT-PCR試劑盒需符合實(shí)驗(yàn)室分子生物學(xué)檢測(cè)的質(zhì)量要求，確保靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確；抗體需保證純度和特異性，符合實(shí)驗(yàn)要求；5溫度要求：根據(jù)試劑耗材的要求，其在運(yùn)輸過(guò)程中需要符合要求的溫度條件。需要確保試劑的完整性和穩(wěn)定性。6保質(zhì)期：試劑耗材的保質(zhì)期需要符合要求，確保試劑在保質(zhì)期內(nèi)。7配件和附件：試劑耗材附帶所需的配件和附件，如使用說(shuō)明書(shū)、安全數(shù)據(jù)表、標(biāo)準(zhǔn)曲線等齊全。4神經(jīng)炎癥在糖尿病視網(wǎng)膜病變中的作用及機(jī)制研究?jī)?nèi)容明細(xì)：項(xiàng)目涉及的原代視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞分離培養(yǎng)、siRNA/質(zhì)粒的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。在原代小鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞中，于不同葡萄糖濃度（如55mM正常糖，25mM高糖）環(huán)境下，進(jìn)行小干擾RNA（siRNA）轉(zhuǎn)染或外源基因過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染。周期：5個(gè)月。驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)1細(xì)胞模型建立成功標(biāo)準(zhǔn)：提供細(xì)胞培養(yǎng)記錄及形態(tài)學(xué)圖片。高糖培養(yǎng)組細(xì)胞需表現(xiàn)出與正常糖組相比可見(jiàn)的形態(tài)變化（如細(xì)胞體增大、骨架重塑等），證明高糖環(huán)境建模有效。2轉(zhuǎn)染效率達(dá)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)于siRNA轉(zhuǎn)染：需提供熒光標(biāo)記siRNA的轉(zhuǎn)染效率圖片。要求平均轉(zhuǎn)染效率（熒光陽(yáng)性細(xì)胞百分比）≥70%。489第4頁(yè)共5頁(yè)②對(duì)于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染：若過(guò)表達(dá)質(zhì)粒帶有熒光標(biāo)簽（如GFP），需提供熒光圖片，要求平均轉(zhuǎn)染效率≥50%。若無(wú)熒光標(biāo)簽，則以下游功能驗(yàn)證為準(zhǔn)。3交付物：完整的實(shí)驗(yàn)記錄、細(xì)胞原始圖片、qPCR擴(kuò)增曲線和溶解曲線圖、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果的原始圖及定量分析數(shù)據(jù)。5激素性股骨頭壞死疾病中CBL泛素化誘導(dǎo)NRF2下調(diào)導(dǎo)致軟骨細(xì)胞氧化壓力性死亡的分子機(jī)制研究?jī)?nèi)容明細(xì)：1培養(yǎng)人軟骨細(xì)胞C28/I2細(xì)胞系，使用地塞米松Dex對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，并完成CBL基因敲降質(zhì)粒構(gòu)建，隨后在細(xì)胞內(nèi)對(duì)CBL基因進(jìn)行敲降處理。對(duì)以上細(xì)胞使用MitoSOXRed流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)線粒體ROS，MitoTrackerDeepRed+Green流式檢測(cè)線粒體形態(tài)和功能、線粒體免疫熒光。技術(shù)要求：每個(gè)細(xì)胞完成3個(gè)生物學(xué)重復(fù)，3個(gè)技術(shù)重復(fù)的實(shí)驗(yàn)。周期：6個(gè)月2構(gòu)建激素性股骨頭壞死動(dòng)物模型：10周齡，雄性C57BL/6小鼠，通過(guò)每周1次肌肉注射25mg/kgDEX（地塞米松），在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)（對(duì)照組）注射等量的磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）作為對(duì)照。設(shè)置：對(duì)照組、模型組、模型組+si-NC和模型組+si-CBL組，按分組進(jìn)行siRNA干預(yù)。注射8周后進(jìn)行取材觀察。小鼠處死后取股骨頭組織拍照，甲苯胺藍(lán)染色檢測(cè)股骨頭冠狀面切片軟骨組織，TUNEL染色觀察冠狀面切片組織細(xì)胞死亡，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ROS，電鏡檢測(cè)線粒體。技術(shù)要求：每組動(dòng)物完成6個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)檢測(cè)完成6個(gè)重復(fù)。周期：6個(gè)月驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求：1流式細(xì)胞儀檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)交付原始數(shù)據(jù)、分析結(jié)果及量化圖。2病理實(shí)驗(yàn)交付不同拍攝倍數(shù)的原始圖片及量化圖。3所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果需完成分析作圖。56單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組和TCGA數(shù)據(jù)整合分析結(jié)合機(jī)制實(shí)驗(yàn)揭示B細(xì)胞調(diào)控前列腺癌免疫惰性表型的機(jī)制（試劑耗材）耗材明細(xì)：序號(hào)實(shí)驗(yàn)規(guī)格單位數(shù)量1VCaP（人前列腺癌細(xì)胞）1×10^6Cells/T25/瓶瓶22PC-3（人前列腺癌細(xì)胞）1×10^6Cells/T25/瓶瓶23WIL2S（人B淋巴細(xì)胞）1×10^6Cells/T25/瓶瓶24WIL2S細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL/組組45CellCounting試劑盒81000t/盒盒16AnnexinV細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒200T/盒盒47重組Anti-IFNgamma抗體100μl/支支28重組Anti-GranzymeB抗體100μl/支支29重組人IL-10蛋白500μg/支支210重組人TGFB1蛋白500μg/支支2915